Осеменение и оплодотворение собак. Щенность. Как правильно выбрать день вязки у собак. Половой цикл суки

Овуляция — процесс разрыва фолликула - пузырька, который под воздействием гормонов гипофиза созревает в яичнике собаки во время каждой течки. Определение овуляции часто имеет принципиальное значение, поскольку по статистике 80% собак, оставшихся бесплодными после спаривания, были повязаны не вовремя.

Дополнительные сложности возникают у владельцев собак, имеющих скрытые (малокровные или бескровные течки), значительное количество шерсти и невысокое либидо. В таком случае иногда требуется определять не только время овуляции, но и наличие течки у собаки вообще.

начинается овуляция

Яйцеклетка, выходящая из фолликула, созревает для оплодотворения 2 дня, поэтому оптимальное время для вязки - через 1-2 дня после разрыва фолликула. В большинстве случаев принято вязать собак на 12-14 день течки, между тем овуляцияу разных собак и даже у одной и той же собаки в разные циклы может происходить от 3го до 23 дня эструса.

Для определения момента овуляции существует довольно много методов разной степени сложности как домашних, так и медицинских. Косвенным признаком овуляции может быть повышение либидо суки, повышение её привлекательности для кобелей, посветление выделений из петли. Многие заводчики пользуются измерением уровня глюкозы в вагинальной слизи, а также специальными приборами для определения электропроводимости оной слизи.

Методы определения начала овуляции у собаки

Если же говорить о более научных методах - их три: вагинальная цитология, УЗИ яичников и анализ на прогестерон крови. Все методы имеют свои плюсы и минусы, свои ограничения.

Вагинальная цитология: мазок, который берется стерильным ватным тампоном с дорсальной стенки влагалища. Суть метода состоит в том, что под воздействием гормонов, выделяемых «крышечкой» фолликула (эти гормоны называются эстрогенами) эпителий влагалища превращается из 4х слойного в 40 слойный, соответственно отшелушивается значительно большее количество поверхностных клеток, которые мы и находим в мазке, предварительно окрасив его.

Плюс метода состоит в его доступности и быстроте - анализ занимает от 5 минут, однако всё, что мы можем сказать по этому анализу - что фолликул зреет\созрел. Мы не можем судить о его разрыве и выходе яйцеклетки.

При разрыве фолликула его донышко начинает превращаться в желтое тело беременности. Этот процесс всегда в норме происходит после овуляции вне зависимости от факта спаривания суки. Желтое тело беременности выделяет гормон, поддерживающий беременность - прогестерон. В крови после овуляции мы наблюдаем стремительный скачок уровня этого гормона - за двое суток уровень прогестерона может подняться с 3 до 45 нмоль. Преимущество анализа - высокая точность. Если уровень прогестерона соответствует постовуляционному - значит фолликул точно созрел и точно разорвался. Сложность состоит в том, что брать анализ крови на прогестерон ежедневно мягко говоря не очень удобно.

На УЗИ яичников мы можем видеть фолликулы, приблизительно подсчитать их, наблюдать их разрыв, то есть наблюдать овуляцию «онлайн». Но и у этого метода есть ограничения: яичники чрезмерно «округлой» или очень крупной собаку (например упитанного алабая) рассмотреть непросто, сложность для визуализации могут представлять также газы, часто находящиеся в кишечнике собаки и особенности анатомического строения (у плоских и длинных собак яичники прикрыты последними ребрами).

Мазок на готовность к вязке или цитология влагалищного мазка - это ориентировочный метод определения стадии полового цикла суки с целью выявления наиболее оптимальных для оплодотворения дней.

Принцип метода

Оценка цитологии влагалищного мазка основана на последовательном изменении клеточного состава слизистой влагалища во время полового цикла. Стенка влагалища состоит из нескольких слоев эпителия. Клетки самых поверхностных слоев эпителия (ороговевающие клетки) практически лишены ядра, неправильной угловатой формы, со слабоокрашенной цитоплазмой. Клетки более глубоких слоев (базальные и парабазальные) - небольшого размера, округлые, с хорошо прокрашенной цитоплазмой и крупным ядром.

Количество поверхностных ороговевающих клеток отражает уровень продукции эстрогенов фолликулами яичников и прогрессивно увеличивается при наступлении наиболее благоприятного периода для оплодотворения. Перед овуляцией количество ороговевающих клеток может достигать 100%. Однако точность цитологического метода зависит от множества факторов и может давать расхождения в сроках до 3-5 дней.

Преимущества метода влагалищного мазка

• несложный и недорогой метод диагностики оптимальных сроков для оплодотворения
• безболезненность и минимум дискомфорта для собаки
• возможность быстрого получения результата

Техника взятия влагалищного мазка

При взятии влагалищного мазка желательно использовать вагиноскоп для предотвращения попадания в пробу клеток из преддверия влагалища.

Для получения мазка во влагалище по направлению к шейке матки вводится ватный тампон, увлажненный стерильным физраствором. Тампон проводится по своду влагалища и прокатывается по стеклу. Затем мазок высушивают и окрашивают.

Интерпретация цитологии влагалищного мазка

• анэструс (период полового покоя) - базальные и парабазальные клетки в небольшом количестве
• проэструс (начало течки) - появляются промежуточные клетки, являющиеся переходной стадией между парабазальными и ороговевающими
• эструс (овуляция) - преобладают ороговевающие клетки - «стеклышки», располагающиеся «черепицей»
• диэструс (фаза после овуляции и до периода полового покоя) - появляются промежуточные, затем парабазальные, базальные клетки и нейтрофилы

Определение оптимальных сроков для вязки

В зависимости от предполагаемой даты овуляции исследование влагалищных мазков начинают с 5-7 дня от начала выделений. Быстрое нарастание количества ороговевающих клеток сигнализирует о необходимости контролировать уровень прогестерона крови, который является более точным критерием сроков овуляции.

Если опираться только на цитологию влагалищного мазка, то в большинстве случаев можно проводить вязку при наличии более 80% ороговевающих клеток в мазке.

Цены, руб.

Цена указана без учета расходных материалов и дополнительных работ

Вопрос: какие анализы нужно пройти кошке перед стерилизацией?

Здравствуйте! Анализы желательны, но делаются на усмотрение владельца. Стоимость биохимического и общего анализа порядка 2100 рублей. УЗИ сердца – 1700 рублей. Операция выполняется двумя методами – полостная (5500 рублей) и эндоскопическая (7500 рублей). И в том, и в другом случае удаляется и матка, и яичники, но эндоскопическая операция менее травматична.

Вопрос: у кошки кал с кровью, в чем может быть причина?

Тест на определение овуляции по слюне у собак.

Заводчиков всегда интересует вопрос: когда вязать суку? Всем известно, что оптимальные дни для покрытия суки отличаются у собак одной породы. Они могут «сдвигаться» в течение жизни даже у одной и той же собаки. Считается, что с увеличением возраста суки вязать ее надо в более поздние сроки. Обычно, это действительно так, но известно немало случаев, когда, наоборот, охота, а она как правило совпадает с периодом овуляции, может наступать ранее, чем это было в предыдущие течки. Кроме того, бывают «экземпляры», у которых охота не совпадает с периодом овуляции – она может наступить позже тех дней, когда больше всего шансов забеременеть.

Опытные заводчики знают, что лучшее время для покрытия – это день до овуляции и первые дни овуляции. В это время выделения светлеют и становятся более слизистыми.

Наличие слизи – необходимое условие для сохранения жизнеспособности сперматозоидов. При отсутствии слизи плодного типа сперматозоиды погибают в кислой среде влагалища. Если собака спит на вашей белой простыне, то можно заметить, что оставленное на месте, где она лежала, пятно, как бы разделено по цвету на две концентрические окружности: внутри круг более темный, снаружи – светлее. В это время петля сильно увеличивается и становится мягкой. Подсчет дней с начала течки, цвет выделений, состояние вульвы и поведение суки – это те признаки, по которым заводчики определяют готовность к вязке. Но это, как бы, вторичные, видимые признаки, обусловленные процессами, происходящими в организме суки во время течки. А именно: яичники начинают вырабатывать фолликулы, содержащие яйцеклетки. Из-за увеличивающегося давления на стенки яичника, большинство фолликул лопаются и зрелые яйцеклетки попадают на воронковидное отверстие яйцепровода – происходит овуляция.

Все эти процессы вызваны гормональными изменениями. С начала течки идет медленный рост гормона эстрагена, достигающий максимума в день овуляции, после чего уровень его быстро спадает в течение одного-двух дней.

Женский стероидный гормон – прогестерон, вырабатываемый в желтом теле яичников, подготавливает матку к имплантации и питании яйца и, если происходит оплодотворение, регулирует обмен веществ в период беременности. Именно по содержанию прогестерона в крови наши западные коллеги определяют оптимальный срок вязки. Его количество должно быть от 6 до 10 единиц. Если меньше 6-ти – вязать рано, если больше 10-ти – уже поздно. Необходимое соотношение гормонов эстрагена и прогестерона можно определить не только по анализу крови, но и по выраженности кристаллизации слюны.

Для определения дня вязки в домашних условиях в настоящее время широко используется метод, открытый еще в 1946 году швейцарским ученым Папаниколау. Этот метод, состоит в том, что анализируя под микроскопом изменение характера кристаллизации высохшей слюны (или шеечной слизи) можно с высокой степенью достоверности судить о наступлении плодного или бесплодного периода и, соответственно, повысить вероятность беременности. По мере увеличения эстрагена в организме увеличивается и количество кристаллов в слюне, причем, в дни овуляции кристаллы приобретают форму, напоминающую папоротник. Этот метод в медицине получил название «арборизация», от латинского arbor – дерево. С появлением изобретенного украинскими учеными тест-микроскопа АРБОР, метод арборизации стал доступен в домашних условиях.

Прибор «Арбор» – это маленький микроскоп в виде трубочки, размером упаковки для губной помады. В специальное отверстие вставляется предметное стеклышко, на котором находится высохшая слюна собаки (в комплекте 32 стекла многократного использования). Направив микроскоп на рассеянный источник света вы наблюдаете ту картину, которая образовалась после высыхания (кристаллизации) слюны.

Для получения достоверных результатов необходимо выполнять следующие правила:

Слюну удобней отбирать в уголке рта – между губой и нижней челюстью. Можно брать пипеткой и потом капнуть ее на предметное стекло, но я беру непосредственно самим стеклом (оно пластиковое и не острое), просовывая его в угол рта. Для лучшего выделения слюны я показываю собаке что-нибудь вкусненькое.

Если на стекле будет много пузырьков, то их нужно убрать, например, наклоняя стекло со слюной в одну сторону и сдвигая пузырьки с поверхности плоской стороной иголки в другую сторону.

Отобранная слюна на стеклышке должна высохнуть естественным образом. Не кладите его на батарею или под лампу, не обдувайте феном. Высыхает она приблизи-тельно за 30-40 минут. Естественно, изначально стекло должно быть сухое и чистое.

Высохшую слюну рассматривают в микроскопе «Арбор». Сравнивая увиденную вами картинку с теми, что приводятся в Инструкции к микроскопу можно определить на какой стадии находится ваша любимая собака. Обычно, я беру сразу несколько контрольных образцов слюны (2-3), т.к. может оказаться, что слюна взята не очень хорошо, например, много пузырьков или слизи.

И еще один совет. В течку, предшествующую той, на которую запланирована вязка вашей собаки, анализируйте слюну с первого до последнего дня течки. Тогда вам станет ясна картина изменения характера кристаллизации слюны и вы сможете сделать прогноз: на какой день наступает пик «цветения папоротников», а значит и тот день, на который, говоря сухим языком собаководов, нужно провести вязку.

Микроскоп Арбор

Естественную половую жизнь, к которой стремится каждая супружеская пара, может обеспечить только естественная регуляция оплодотворения. Открытый еще в1946 году швейцарским ученым Папапиколау метод состоит в том, что анализируя с помощью микроскопа изменение характера кристаллизации слюны в течение менструального цикла, можно с большой достоверностью судить о наступлении плодного и бесплодного периода

Микроскоп Арбор позволяет осуществлять:

Планирование беременности,

Определение благоприятных и неблагоприятных дней для зачатия ребенка,

С высокой степенью вероятности планировать пол будущего ребенка,

Физиологический метод контрацепции,

Контроль процесса гормонального становления в подростковом и юношеском возрасте,

Своевременное выявление нарушений детородной функции, предрасположенности к различным заболеваниям,

Наблюдение за гормональным фоном в первый триместр беременности (предотвращение возможного выкидыша),

Контроль наступления первого после родов менструального цикла, в котором возможна беременность,

Своевременное выявление гормональных нарушений при использовании внутриматочной спирали,

Контроль восстановления детородной функции после прекращения приема противозачаточных гормональных препаратов,

Самоконтроль гормонального статуса при гормонозаместительной терапии в постклимактерическом периоде.

По данным американских ученых – медиков, в течение женского цикла есть день, когда опасно вступать в контакт с целью зачатия ребенка. По той причине, что существует вероятность рождения неполноценного потомства с генетическими нарушениями. Яйцеклетка живет недолго, но даже за это короткое время она успевает постареть и нельзя допустить, чтобы сперматозоид встретился с такой яйцеклеткой. Что же это за день? Увядание яйцеклетки соответствует периоду спада кристаллизации. Вступление в контакт в этот период с целью зачатия грозит неприятностями для развития будущего ребенка. А определить роковой момент поможет все тот же Микроскоп Арбор.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ о практической ценности микроскопа миниатюрного Арбор.

1. Международный Научно-Медицинский Центр “Здоровье семьи”

Генеральный директор Международного центра здоровья семьи доктор медицинских наук, профессор В.Н.Запорожан

Зав. поликлиникой, кандидат медицинских наук В. В. Беспоясная

2. Консультативный центр по эндокринной патологии беременных и гинекологических больных

Зав. кафедрой профессор, доктор медицинских наук В. В. Щербакова

3. Украинский Институт Усовершенствования Врачей Кафедра Акушерства и Гинекологии №1

Заведующий АН Украины, член-корреспондент АМН России, лауреат премии им. Сингерела, доктор медицинских наук, почетный член национальных научных обществ акушеров-гинекологов НР Болгария, Венгерской НР, СР Румынии, СФР Югославии, член ассоциации акушеров-гинекологов Европы, профессор Л.В.Тимошенко

ЗАКЛЮЧЕНИЕ: Микроскоп Арбор, созданный фирмой "Киев-Донбас" при участии сотрудников кафедры акушерства и гинекологии №2 КИУВ, является удобным устройством индивидуального пользования для объективизации состояния собственного здоровья женщины. Наряду с этим, мини-микроскоп может быть использован каждым врачом акушером-гинекологом и гинекологом-эндокринологом любого уровня / участковым врачом, врачом ЦРБ, клиники / для осуществления скрининг-диагностики нарушений и коррекции функции яичников у женщин различных возрастных групп. При помощи мини-микроскопа Арбор можно определять фертильные и нефертильные периоды менструального цикла, что является необходимым для осуществления естественной контрацепции, выбрать наиболее благоприятное время для зачатия. Его можно использовать как дополнительный метод исследования при ряде гинекологических заболеваний. Проведенный чешскими исследователями в 1993 году анализ эффективности тест-микроскопа Арбор показал, что по основным характеристикам (коэффициент увеличения, способность динамического слежения за изменением кристаллизационной структуры) тест-микроскоп «Арбор» не имеет аналогов среди данного класса оптических индивидуальных средств самоконтроля гормонального статуса женщин.

Только у прибора «Микроскоп Арбор» корпус изготовлен из металла (долговечность), аналоги изготовлены из пластика.

Дизайн у микроскопа «Арбор» разработан итальянцами, прибор имеет размер тюбика туши для ресниц, помещен в пластиковый футляр с крышкой, футляр снабжен кассетницей для хранения серии мазков. Микроскоп Арбор комплектуется набором предметных стекол (32 шт.) для серии мазков. У аналогов всего несколько стекол.

Линза у «Арбор-Элит» изготовлена из стекла, это обеспечивает долговечность прибора и высокое качество изображения. У аналогов линза пластиковая- изображение менее четкое, линза недолговечна.

-«Арбор-Элит» обеспечивает 100-кратное увеличение (микроскопическая картина гораздо больших размеров, чем у аналогов), аналоги только 20-40- кратное.

Половая зрелость собаки.

Половая зрелость суки.
Как и у кобеля, половая зрелость суки зависит от возраста и размера породы (от 6 до 18 месяцев). Первые течки, в основном, проходят дискретно и могут быть не замечены. Следует, однако, различать у сук половую (способность к овуляции) и физиологическую (способность выдерживать все сроки беременности и родить щенков) зрелость, получение потомства от них в эти первые течки нежелательно, т. к. родовые пути к данному моменту не достигают своего развития. С наступлением половой зрелости функциональная деятельность генитального аппарата у самки приспосабливается к ритму цикла, который, в основном проявляется 2 течками в год.

Течка у сук.

Течение цикла.
Во время проэструса растущие фолликулы яичников под влиянием гипофиза вырабатывают гормоны, называемые эстрогенами, которые отвечают за изменение поведения (привлечение кобелей, потребность ласки, вылизывание петли) и физического состояния самки. Слизистая оболочка петли наполнена кровью, из ее просвета выделяется кровянистая жидкость, позволяющая кобелю находить суку по следу, хотя она его еще не подпускает.
Период принятия кобеля обычно соответствует фазе эструса. Часто это сопровождается рефлекторной реакцией, для которой характерна поза, проявляющаяся отведением хвоста в сторону, вызываемым стимуляцией петли. Однако к этому признаку следует относиться с осторожностью, поскольку некоторые суки допускают кобеля и вне периода овуляции. Во время эструса истечения из петли становятся светлыми и превращаются в слизь, что облегчает вязку.
В стадии овуляции яйцеклетки выходят недозревшими, но готовыми к оплодотворению, как правило, 48 часов спустя. В отличие от большинства других видов животных яичники сук начинают вырабатывать прогестерон в течение нескольких дней до овуляции. Его концентрация в крови постепенно нарастает независимо от того, оплодотворена самка или нет. Поэтому концентрация прогестерона в крови позволяет определить у собак время овуляции, но не беременности.
Затем концентрация прогестерона в крови стабилизируется и остается постоянной на протяжении всего постэстрального периода благодаря секреции желтых тел, образовавшихся в яичниках после выхода из них овоцитов. Этот гормон подготавливает матку к имплантации эмбриона и обеспечивает ее развитие, т. е. подготовку к обычной беременности. Его секреция резко падает через 2 месяца с момента овуляции, обеспечивая тем самым условие лактации и инволюцию (обратное развитие) матки, вплоть до фазы полового покоя (анэструса).

Вязка или искусственное осеменение.

Техника мазка слизистой влагалища.
После осмотра разбухшей петли и оттягивания ее складки вниз шпатель вводят верти- кально вдоль задней стенки влагалища так, чтобы он не попал в ямку клитора. Когда шпатель достигает верхнего свода влагалища, ему следует придать горизонтальное положение и продвигать его как можно дальше, не прилагая при этом усилий. Затем с помощью круговых движений собирают выделения секрета и отслоившиеся клетки вокруг шейки матки.
В начале течки шпатель обычно становится красным, а в конце фазы проэструса он может быть розового цвета или бесцветным или с наличием гноя в случае инфекционного воспаления матки или влагалища.
Затем кончик шпателя (с содержащимся на нем материалом) аккуратно прокатывают по предварительно обезжиренному предметному стеклу, во избежание наслоения клеток стараются не попадать дважды на одно и то же место.
Затем нанесенный на предметное стекло цитологический материал фиксируют и отправляют к ветеринарному врачу либо окрашивают для непосредственного исследования.

Анализ мазка.
Помимо уточнения момента овуляции, использование влагалищных мазков может иметь много других показаний. Если от вас сбежала собака в состоянии течки или вы подозреваете, что имела место нежелательная вязка через решетчатую стенку клетки, то ветеринарный врач может определить возможное наличие сперматозоидов (в течение 6 часов после коитуса). Он может также определить риск оплодотворения в зависимости от стадии полового цикла (например, если сука находится в фазе анэструса, начала проэструса или постэструса, то возможность оплодотворения минимальна, по крайней мере, это менее значимо в сравнении с риском раннего абортирования при назначении лекарственного препарата).
С помощью мазков можно контролировать эффективность определенных методов лечения в фазе анэструса, обычно противопоказанных в период половой активности, например, при проведении какой-либо гормональной терапии.
Наконец, мазки используют для количественного определения гормонов при выявлении некоторых причин бесплодия (скрытая течка или таковая без фазы овуляции, персистенция желтого тела в яичниках, инфекционное воспаление влагалища и т. д.). Влагалищные мазки показаны к использованию, т. к. сама процедура не вызывает сложности, такие преимущества, как быстрота выполнения и небольшая стоимость, могут оказать неоценимую услугу в воспроизводстве собак. Тем не менее, в некоторых случаях, когда интерпретация мазков вызывает сомнение или полученные результаты цитологического анализа не сопоставимы с клинической картиной, или если поездка для проведения вязки или искусственного осеменения оспаривается, то владелец может дополнить этот анализ другим, более точным - количественным определением прогестерона в крови.
Количественное значение прогестерона в крови (тест на установление выделения яйцеклетки из яичника) определяют в до- и постовуляционный периоды, при этом концентрация прогестерона в плазме крови у суки, как правило, возрастает в течение нескольких дней до 40 нг/мл и более в сравнении с ее базовым значением (менее 2 нг/мл). Варьирование уровня прогестерона в крови как у разных собак, так и у одной и той же особи (от цикла к циклу) происходит относительно быстро. Если мы вспомним, что 80% самок готовы к вязке на 12-й день их течки, то можно прийти к заключению, что овуляция бывает или более ранней, или более поздней (например, доберман, немецкая овчарка).
В настоящее время считают, что овуляция наступает при содержании общего прогестерона в крови, превышающего 15 нг/мл (необходимо учитывать отклонения, связанные с проведением количественного анализа в разных лабораториях). При этом первую вязку или искусственное осеменение следует проводить в течение 48 часов с момента ее возникновения (учитывают время, необходимое для созревания овоцитов), а контрольную - через 2 дня после первой. Такая степень достоверности определения сроков овуляции позволяет увеличить не только процент удачных вязок или искусственного осеменения, но также и плодовитость. Дело в том, что малочисленность помета, которую часто приписывают возрасту самки или недостаточному количеству овоцитов, иногда объясняют неправильным выбором даты вязки.
Следовательно, дополнительные методы исследования, основанные на использовании влагалищных мазков и определении количественного содержания прогестерона в крови с соблюдением всех требований, позволяют обеспечить более точный контроль течки и рентабельности производства (увеличение числа оплодотворений, плодовитости, уменьшение числа бесполезных поездок в случае неудачной вязки).

Диагностика инфертильности (бесплодия) у самки.
Перед тем как лечить суку от бесплодия, необходимо установить причину его возникновения. Например, регулярное проведение анализа крови на содержание прогестерона у самки, страдающей инфертильностью, можно дополнить методами исследования на другие гормоны и результатами клинического обследования, что позволит определить, заключается ли причина в ановуляторном цикле, рассасывании эмбрионов в связи с инволюцией желтого тела, несовершенстве половой зрелости или избытке мужских гормонов вследствие проведенного лечения.

Определение необходимости кесарева сечения.

У большинства пород с короткой мордой (брахицефалов), таких, как бульдоги или мопсы, роды бывают затруднены, поэтому ветеринарный врач зачастую вынужден прибегать к кесареву сечению. Если провести его слишком рано, то щенки, оказавшись недоношенными, как правило, гибнут от недоразвития респираторного аппарата в течение нескольких часов с момента рождения. Если провести его слишком поздно, это приведет к сдавливанию плода в родовых путях (в области таза), что, в свою очередь, вызовет состояние церебральной аноксии (уменьшение кислорода в тканях головного мозга). Дело в том, что у собак выживаемость плода связана с поздним развитием легочного поверхностно-активного вещества (сурфактанта), определяющего при рождении дыхательную способность щенков. Это формирование легких напрямую связано с падением сопутствующего родам уровня прогестерона в крови, происходящего в течение нескольких дней до идеальной даты родов. Таким образом, простой анализ крови на количественное содержание прогестерона в крови точно укажет ветеринарному врачу на возможность выживания щенков после проведения кесарева сечения. Использование такого метода оценки позволило значительно увеличить выживаемость щенков после кесарева сечения, особенно у бульдогов, более 90 % которых появляется на свет именно таким путем.

Количественный анализ на лютеонизирующий гормон (ЛГ).
ЛГ (лютеотропный гормон, способный трансформировать клетки фолликула, обеспечивающие питание овоцита в желтом теле, которое вызывает секрецию прогестерона)- гормон, выделяемый гипофизом, провоцирует овуляцию. Определение пика секреции этого вещества позволяет достаточно рано определить овуляцию, а не его последствия (увеличение содержания прогестерона). За исключением нескольких конкретных случаев диагностики инфертильности, данный метод еще не получил широкого распространения в практической ветеринарии.

Вязка.

Нарушения фертильности (способности к деторождению) у сук.

Сегодня выходит на первый план грамотный, научно-обоснованный подход к племенному разведению собак. Высокая племенная ценность, уникальность некоторых особей является предпосылкой к тщательному обследованию репродуктивного аппарата собак не только с целью исключения инфекционных заболеваний, но и для выявления сроков овуляции. Особенно актуально такое обследование для животных, выезжающих на вязку в другие регионы страны и мира.

Многие заводчики понимают необходимость диагностики эструса, однако, дефицит информации, разрозненность данных по этому вопросу, а также недостаток специалистов в ряде случаев приводит к получению недостоверных данных или их неправильной интерпретации. Таким образом, наличие большого спроса на диагностику полового цикла у сук явилось причиной разработки алгоритма его исследования с выведением нормативных показателей и определением параметров овуляции.

Прежде всего, необходимо дать краткую характеристику полового цикла сук. Собака является моноцикличным животным, периодичность цикла составляет от 4 до 12 месяцев. Выделяют следующие стадии: проэструс, эструс, метэструс и анэструс. Начало течки, или проэтрус, проявляется соответствующими изменениями в половом аппарате: отмечается рост фолликулов и увеличение в них количества рецепторов к ФСГ. Клинически эта стадия характеризуется гиперемией слизистой влагалища, отёчностью вульвы, появлением кровянистых выделений. Под влиянием фоллитропина совместно с различными факторами роста происходит стимуляция развития примордиальных фолликулов, а также дифференцировка и пролиферация клеток гранулёзы. Из множества начинающих рост фолликулов созревают лишь единицы. Стадия эструса соответствует половой охоте и овуляции, и именно в этот период следует проводить вязку. Чёткую границу между стадиями уловить трудно, однако во время эструса наблюдается размягчение вульвы, изменение характера вагинальных выделений, готовность животного к спариванию. Затем на месте лопнувшего фолликула образуется полость, которая быстро заполняется гранулёзными клетками, наполненными жёлтым пигментом лютеином. Развитие жёлтого тела происходит в стадию метэструса, не зависимо от того произошло оплодотворение или нет. Как известно, беременность у собак имеет продолжительность 58-65 суток, и после её разрешения начинается стадия анэструса, или полового покоя.

Становится понятным, что подготовка к овуляции протекает под воздействием комплекса факторов, важнейшую роль из которых играют гормоны. Известно, что эстрогены и гестагены регулируют пролиферативные процессы в слизистой оболочке влагалища, которая состоит из многослойного плоского эпителия. В зависимости от степени зрелости, вагинальный эпителий может быть представлен парабазальными, промежуточными, поверхностно-промежуточными и поверхностными клетками. Морфологически они различаются следующим образом: парабазальные клетки самые мелкие, округлой формы, большую часть клетки занимает ядро. Промежуточные приблизительно вдвое крупнее за счёт цитоплазмы, поверхностно-промежуточные клетки истончаются, приобретают несколько угловатую форму. Поверхностные клетки самые крупные, часто безъядерные, содержащие гранулы кератогиалина В фазе анэструса вагинальный эпителий тонкий и бледный, в основном представлен парабазальными клетками. Овуляторный пик характеризуется наибольшей степенью зрелости вагинального эпителия, т.е. выявлением в вагинальном мазке более 90 % поверхностных клеток с наивысшим процентом кариопикноза (более 80%) и большой восприимчивостью к красителю. Развитие жёлтого тела приводит к появлению в мазке большого количества роговых чешуек, лейкоцитов и промежуточных клеток.

В нашем исследовании мы поставили следующие задачи:

Выявить динамику изменения эстрадиола и прогестерона в период проэструса и эструса и сопоставить её с результатами цитологического исследования вагинальных мазков
подвергнуть анализу данные о сроках вязки и оплодотворяемости в связи с эндокринным статусом и степенью зрелости вагинального эпителия с целью определения оптимальных параметров для спаривания

Исследованию подверглись 22 собаки в возрасте от 1,5 до 7 лет в различные периоды проэструса и эструса. Концентрация прогестерона и эстрадиола в сыворотке крови определялась иммуноферментным методом с использованием анализатора вертикального сканирования и специальных диагностических наборов на базе клинико-биохимической лаборатории СПбГАВМ. Взятие мазков осуществлялось стерильными ватными палочками с бокового свода влагалища, препараты фиксировались специальным красителем Май-Грюнвальда и докрашивались красителем Романовского-Гимза. В мазках высчитывалось процентное соотношение парабазальных, промежуточных, поверхностно-промежуточных и поверхностных клеток из 100 штук.

Анализируя полученные результаты, мы выявили общую закономерность изменения динамики гормонов для всех исследованных животных и выделили следующие фазы проэструса:

1. Фаза относительного покоя. Продолжается от начала пустовки в течение 5-15 суток. Не смотря на выраженные изменения состояния наружных половых органов, уровень прогестерона и эстрадиола находится на относительно низком уровне, не превышая нормативные значения соответствующие стадии анэструса Считается, что в этот период происходит стимуляция развития примордиальных фолликулов, пролиферация клеток гранулёзы под воздействием ФСГ.
2. Фаза начала роста эстрадиола. В течение 2 - 3 суток после первой фазы обнаруживается некоторое повышение концентрации эстрадиола. В этот период фолликулы продолжают созревать и синтезируют достаточное количество эстрогенов, которые, в свою очередь стимулируют выброс лютенизирующего гормона.
3. Фаза начала роста прогестерона.. Под воздействием лютеотропина стероидогенез в фолликулах переключается на выработку прогестерона. В дальнейшем рост прогестерона будет продолжаться, минуя овуляцию, вплоть до стадии метэструса. Однако, выделяется ещё одна фаза:
4. Фаза пика эстрадиола. Продолжительность этой фазы 1 - 3 суток. Резкий выброс эстрогенов обусловлен гибелью большого числа фолликулов, не достигших окончательной зрелости с высвобождением большого количества фолликулярной жидкости. Пиковые концентрации эстрадиола, определяемые в крови, приводят к мощному выбросу гонадолиберина гипоталамусом, а следовательно - и к секреции гонадотропных гормонов, в наибольшей степени ЛГ. Предовуляторный выброс лютеотропина способствует дальнейшему росту уровня прогестерона. Последний вместе с ФСГ и ЛГ индуцирует синтез протеолитических ферментов в яичниках, а комплекс факторов (натрийуретический пептид, ангиотензин II, пролактин, нейропептид У, вазопрессин, брадикинин) увеличивают гидростатическое давление в фолликулярной полости.

Таким образом, под воздействием вышеперечисленных причин фолликулярная стенка разрывается и происходит овуляция. По данным различных исследователей, овуляции соответствует концентрация прогестерона в пределах 35 - 55 нмоль/л. В наших исследованиях мы выявили при повышении прогестерона до 32 - 43 нмоль/л довольно резкое падение уровня эстрадиола.

Результаты исследований представлены в таблице.

ДИНАМИКА ИЗМЕНЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ ПРОГЕСТЕРОНА И ЭСТРАДИОЛА В СТАДИЯХ ПРОЭСТРУСА И ЭСТРУСА У СУК

Необходимо отметить наличие чёткой взаимосвязи между гормональным статусом в конкретный период пустовки и цитологической картиной вагинальных мазков. Так, мазки, взятые в 1 фазу проэструса, характеризовались большим количеством эритроцитов, эпителий был представлен приемущественно парабазальными клетками (67,4+4,3%) и промежуточными (30,5+2,8%). Поверхностно-промежуточные клетки встречались редко (3,1+0,4 %). Во второй фазе соотношение клеток несколько менялось: увеличивалось содержание промежуточных до 47,3+3,7 % и поверхностно-промежуточных до 15,6±2,1 % на фоне снижения процента парабазальных - до 37,1+1,2 %. Дальнейшая эстрогенизация приводит к пролиферации влагалищного эпителия, о чём свидетельствует изменение цитологического профиля на 3 стадии проэструса в сторону повышения процента поверхностно-промежуточных клеток (32,4±2,0 %) и появления единичных поверхностных (4,1+0,32%). Доля промежуточных клеток уменьшалась до 42,0+2,6 % , а парабазальных - до 21,5+1,8 %. Довольно резкие цитологические изменения происходили в 4 фазе - пиковые концентрации эстрадиола приводили к значительному увеличению самых зрелых клеток. Процентное содержание поверхностных эпителиальных клеток составляло в этот период порядка 76,3+4,9 %, многие из которых были безъядерные, Доля поверхностно-промежуточных и промежуточных была 20,4±1,6 % и 3,3+0,3 % соответственно. Следует указать, что многие клетки изменяли восприимчивость к красителю, становясь зозинофильными. И, наконец, во время эструса почти все клетки вагинального эпителия в мазке были поверхностные (91,3+ 3,2%), в большей части из них ядро отсутствовало. И лишь 8,7+0,34 % составляли поверхностно-промежуточные клетки.

Мы провели обследование 17 сук для выявления оптимального дня вязки. Предварительно исключали наличие скрытых инфекций методом ПЦР-диагностики. У каждой особи во время пустовки проводилось определение уровня прогестерона и эстрадиола, а также цитологическое исследование вагинальных мазков. Мы рекомендовали планировать вязку при уровне прогестерона 30-35 нмоль/л и повторно через 48 часов. Процент оплодотворяемости составил 100%.

Концентрация прогестерона является ключевым критерием для определения сроков овуляции, но определение уровня эстрадиола и цитологическое исследование влагалищных мазков вносят ценные уточняющие данные. При первичном обращении во время пустовки рекомендуем делать первый анализ на 3-5 сутки проэструса. При низких концентрациях половых гормонов и отсутствии пролиферативных изменений вагинального эпителия повторное взятие анализов следует проводить через 3-4 суток. Необходимо отметить, что при начале роста прогестерона можно прогнозировать динамику его изменения, сделав как минимум, два исследования с интервалом 48 часов. По данным наших исследований в среднем уровень этого гормона в крови за сутки увеличивается на 6,52 нмоль/л, однако следует придерживаться индивидуальных графиков. Рекомендуем использовать полученные нами данные для практической работы ветеринарных специалистов и кинологов.

Васильева С.В., Васильев Р.М.
Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины